样品保存时间研究和样品批量测试--最大化提高内毒素测试效率的方法

为了节约昂贵的鲎试剂、消耗品成本，提高微孔板的使 用率，用户应进行简单的样品保存时间研究，以确定在 批量测试的样品保存时间超过 24 小时的情况下样品不 会损失内毒素。样品保存时间研究旨在帮助质量控制实 验室制定正确的“标准操作规程”， 明确规定样品在测 试之前可以存放的时间  1。样品保存时间研究的重要内 容之一是存放样品的容器。用于内毒素测试的样品应采 集并存放在不干扰鲎试剂测试和不吸收内毒素的容器 中。聚丙烯容器会吸收内毒素， 而聚苯乙烯或硼硅酸盐 玻璃容器是最佳的样品容器。

至少对 4 个时间点进行样品保存时间研究，  才能确保研 究结果有效且准确 2。比如，研究的时间点可以选在第 0 天、第 1 天、第 3 天、第 7 天。可以对水样品、制程 样品、原料样品、甚至成品药样品进行保存时间研究，  确定测试前的有效保存时间。在进行保存时间研究时，对每一种样品加入已知浓度的内毒素。建议用户在标准 曲线中点处加入尽量低的浓度的内毒素。但加入的浓度 越高，越能在 2 倍该浓度内回收样品。例如美国注射剂 协会（PDA）“TR 82 技术报告”中规定加入的浓度为 5 EU/mL（EU/mL：每毫升内毒素活性单位） 2。在建 议的所有时间点测试样品， 测量并确认样品未损失内毒 素。

如果不进行研究就保存样品，测试就可能出现假阴性结 果，从而导致患者安全风险。实验室一旦确认样品在  7 天内未损失内毒素， 就可以在“标准操作规程”中规定 样品的保存时间或要求的测试时间可以延长到 7 天，以 便每周一次性集中测试所有保存的样品， 而非每天都耗 费精力来测试样品。

Sievers  Eclipse 是完全合规的内毒素测试平台， 满足 USP <85>、 EP 2.6.14、JP 4.01、ChP <1143>等药典 的要求。此平台提 供包 含 5 个参考标准品内毒素（RSE ，Reference Standard Endotoxin）浓度的嵌入 式标准曲线，浓度范围为  50 - 0.005 EU/mL ，一式三份，为每个样品提供嵌入式阳性产品对照液（PPC, Positive Product Control） 。此平台是高通量内毒素测 试平台，用户可以在单次测试中大大增加样品数量，从而提高测试效率、降低总体成本。已经或打算延长样品 保存时间的用户在用  Eclipse 进行测试时，可以采用鲎试剂“冻融法（Freeze-Thaw）”。事实证明，在初次重构后冷冻鲎试剂， 稍后在 Eclipse 上用解冻的该试剂 来测试样品，测试结果同非冻融法完全一致 。